1028 Pronadisa Pronadisa 1028 Агар для определения ДНКазы, 500 гр (DNAse Test Agar)

Агар для определения ДНКазы применяется для дифференциации микроорганизмов с использованием соотношения между коагулазо-положительной и ДНКазной активностью. Особенно эта дифференциальная среда рекомендуется для идентификации патогенных стафилококков.

Казеиновый и соевый пептоны являются источниками питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Дезоксирибонуклеиновая кислота дает возможность обнаружения ДНКазы, которая ее деполимеризует.

Посеять тестируемый материал широкополосным штрихом (длиной 2 см) на поверхности чашки. На одну и ту же чашку можно одновременно нанести 4–5 разных образцов. Инкубировать 18–24 часа при 35±2°C.

Получив колонии, добавить одну каплю 1 N соляной кислоты или несколько капель 0,1% раствора толуидинового синего. Для некоторых штаммов необходимо увеличивать концентрацию HCl до 2 N для получения хорошей положительной реакции.

В присутствии разбавленной соляной кислоты в результате реакции с ДНК в среде культивирования образуется мутный осадок. Колонии микроорганизмов, продуцирующих дезоксирибонуклеазу, будут окружены прозрачной зоной, содержащими фракции растворимых нуклеотидов деградированной ДНК, которые не осаждаются соляной кислотой. Толуидиновый синий формирует окрашенные комплексы с полимеризованной ДНК.

Результаты

В присутствии соляной кислоты:

- ДНКазо-положительный тест:

прозрачная зона, окружающая посевной штрих, причем остальная часть чашки остается матовой. Для формирования положительной реакции нужно приблизительно 5 минут.

- ДНКазо-отрицательный тест:

отсутствие прозрачной зоны вокруг посевного штриха.

В присутствии толуидинового синего:

- ДНКазо-положительный тест:

появление розового ореола вокруг посевного штриха. Остальная часть чашки остается синей.

- ДНКазо-отрицательный тест:

отсутствие розового ореола вокруг посевного штриха.

Для некоторых требовательных организмов может оказаться необходимым добавление крови. При добавлении разбавленной соляной кислоты образуется четкий матовый ореол вокруг ДНКазо-положительных организмов. ДНКазная среда с кровью не должна использоваться при изучении гемолитических реакций, и кровь следует добавлять только в случае крайней необходимости.

Микробиологический тест

Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации при температуре 35±2°C и наблюдались через 18–24 часа.